木瓜蛋白酶诱导的肺炎小鼠模型的建立

木瓜蛋白酶诱导的肺炎

木瓜蛋白酶对支气管肺泡灌洗液免疫细胞的影响。木瓜蛋白酶诱导的小鼠肺炎模型，小鼠连续3天给予不同剂量的木瓜蛋白酶(35 ~ 75 μg)。实验结束时收集支气管肺泡灌洗液。计数BALF样品中mCD45阳性细胞(A)、嗜酸性粒细胞(B)。计算mCD45中嗜酸性粒细胞的百分比(C)。数值表示为平均值±SEM。单因素方差分析采用Bonferroni检验，n=5， **P<0.01， **P<0.001。

木瓜蛋白酶诱导的小鼠肺炎模型。小鼠连续3天给予不同剂量的木瓜蛋白酶(35 ~ 75 μg，灌胃)，(D)病变表现为血管和支气管周围混合性炎症细胞浸润，部分支气管粘液形成，(A-C,E)木瓜蛋白酶处理后细胞评分及血管和支气管周围嗜酸性粒细胞浸润增加。

[1] Zhou WS, Zhang J, Toki S, et al. COX Inhibition Increases Alternaria-Induced Pulmonary Group 2 Innate Lymphoid Cell Responses and IL-33 Release in Mice[J]. J Immunol. 2020, 205(4):1157-1166.

[2] Kabata H , Flamar A L, Mahlakõiv T, et al. Targeted deletion of the TSLP receptor reveals cellular mechanisms that promote type 2 airway inflammation. Mucosal Immunol. 2020, 13(4) :626-636.

ALT诱导的肺炎小鼠模型的建立

连续4次经鼻给药ALT (100μg/80μL)或PBS(对照组)诱导C57BL/6小鼠肺炎。

哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)免疫细胞浸润

ALT对支气管肺泡灌洗液免疫细胞的影响。小鼠连续4天给予ALT (100 μg)，实验结束时收集支气管肺泡灌洗液，计数BALF样品中mCD45阳性细胞(A)、嗜酸性粒细胞(B)，计算mCD45中嗜酸性粒细胞的百分比(C)。数值表示为平均值±SEM。单因素方差分析采用Bonferroni检验，n=5， **P<0.01 **P<0.001。

脓毒症是世界范围内最致命的疾病之一，常导致多器官功能衰竭，主要原因是炎症反应不受控制^[3]。脂多糖(lipopolaccharide, LPS)是革兰氏阴性细菌内毒素的一种成分，通过刺激宿主细胞产生促炎细胞因子诱导急性炎症，被认为是急性器官损伤的主要原因^[4]。百奥赛图建立了一种简便、稳定的LPS诱导的C57BL/6小鼠急性炎症模型。

LPS诱导的C57BL/6小鼠急性炎症模型的建立

第0天腹腔注射13mg/kg LPS建立急性炎症小鼠模型，诱导前一天注射Dex (1.2mg/kg, 1次)或Anti-TLR4 Ab (10mg/kg, 1次)。每天测定成活率和体重，直至第7天。

抗TLR4抗体对急性炎症小鼠模型的疗效验证(内部合成)

右美托咪唑(Dex）和抗TLR4抗体对LPS诱导的急性炎症模型的影响。

与LPS组比较，Dex和抗TLR4抗体组小鼠体重无显著差异，但生存期延长，血清中IL - 6水平显著降低。

参考文献

[3] Hwang JS, Kim KH, Park J, Kim SM, Cho H, Lee Y, Han IO. Glucosamine improves survival in a mouse model of sepsis and attenuates sepsis-induced lung injury and inflammation. J Biol Chem. 2019, 294(2):608-622.

[4] Evans CE, Peng Y, Zhu MM et al. Rabeprazole Promotes Vascular Repair and Resolution of Sepsis-Induced Inflammatory Lung Injury through HIF-1α. Cells. 2022, 11(9):1425.

LPS与PPE联合诱导COPD小鼠模型的建立

实验动物:C57BL/6, 8-10周龄，雌性
造模试剂:LPS (7μg)、PPE (0.3U)滴鼻

检测指标:体重、存活率、肺组织、肺气肿、炎性细胞、细胞因子

基于LPS与PPE联合在C57BL/6小鼠中诱导COPD模型。基于LPS与PPE重复鼻内给药4周的COPD模型示意图。

LPS和PPE诱导小鼠的体重变化(A)和存活率(B)。

LPS和PPE联合诱导小鼠后，FACS分析肺泡灌洗液(BALF)中免疫细胞的浸润。白细胞(A);中性粒细胞(B和E);巨噬细胞(C和F);中嗜酸性粒细胞(D和G)。数据以Mean±SEM表示，采用单因素方差分析，采用Dunnett多重比较检验。 (*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)

PPE/LPS处理诱导实质和气道炎症。用苏木精和伊红(H&E)对福尔马林固定、石蜡包埋的PBS或PPE/LPS联合处理的小鼠肺进行染色。箭头表示炎症灶，星号表示轻中度肺气肿。数据以Mean±SEM表示，采用单因素方差分析，采用Dunnett多重比较检验。 (*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)