灌胃给药

技术介绍

      药物经口腔，食管直接送入胃中，经过消化过程进入体循环，再到血液发挥作用。

操作步骤

1.保定好小鼠，尽量使小鼠身体竖直；
2.针头经小鼠嘴角插入口腔，延上颚抵达后咽部，轻抵其上颚，将灌胃针沿上颚缓慢插入食管,通过食管的膈肌部位时略有抵抗感；
3.如小鼠挣扎，或呼吸异常，或遇阻力，暂停给药，拔出灌胃针重新插入，如动物安静呼吸无异常，即可缓慢注入药液；
4.给药结束，观察动物无异常后，放回笼盒内。

优点：剂量准确，是常用，比较安全、方便的给药方法；
缺点：吸收不恒定，误差较大。如某些药物因本身的物理性质而不能被吸收。

皮下注射

技术介绍

操作步骤   

优点：吸收速率均匀而缓慢，作用持久；
缺点：仅适用于对组织无刺激性的药物，否则可引起剧痛和组织坏死。

常见给药方式，适合刺激性小的水溶性药物。

操作步骤

1.将小鼠固定在固定器内；
2,。用酒精棉球擦拭尾部血管使血管扩张，并使表面角质软化；
3.左手拇指和食指捏住尾部，右手持注射器，使针头部位与静脉平行，且针尖截面朝上；
4.从食指平面位置，针尖轻压静脉，水平进针，刺入后先缓慢推注少量药液，如无阻力，可继续注入；
5.注射完毕后用无菌干棉球按住进针孔，出针。

操作步骤

1.一人保定小鼠，或将小鼠置于固定器内，暴露后肢；
2.左手抓紧小鼠后爪，调整进针位置，使胫前肌向上；
3。右手持注射器，从胫前肌的远端进针，进针不要过深，开始注射；
4.给药结束后，用棉签按压出针。

操作步骤：

1.左手保定小鼠，暴露需要给药一侧肿瘤，取酒精棉球对肿瘤表面皮肤擦拭消毒，右手持1 mL胰岛素注射器，截面向上进针；
2.根据肿瘤大小选择注射点位（如右图所示），给药体积不宜过大；
3.给药结束后注射器针头截面向下，出针。

不同点位注射：

1.单点注射：注射器通过单一进针口，经过皮下区域沿长径方向进入肿瘤，注射点为瘤组织中部；
2.两点注射：瘤体积在80 -140 mm3时，注射器通过单一进针口经过皮下区域经过皮下区域沿长径方向注射点为瘤组织长径的1/3和2/3处；
3.三点注射：瘤体积大于140 mm3时，注射器通过单一进针口经过皮下区域，注射点为瘤组织长径的1/3和2/3处，出针后保持针尖在皮下，注射第二针时直接由进入肿瘤，注射点为瘤组织中部靠外侧。

滴鼻给药

图片来源：https://iacuc.ucsf.edu/sites

操作步骤

1.使用麻醉剂对小鼠深度麻醉后，仰卧放置于左手心；
2.使用移液器带枪头吸取药液；
3.随动物呼吸进行滴鼻操作，液滴大小保持一致，速度均匀，双侧鼻孔交替进行；
4.保定好小鼠， 避免药液进入口腔；
5.完成后，小鼠放回观察小鼠呼吸状态直至苏醒。

优点：鼻粘膜血管丰富，鼻内给药效果类似于静脉注射；
缺点：易导致小鼠窒息；未麻醉好，打喷嚏会导致小鼠给药剂量不准确；
应用：肺损伤，肺纤维化，鼻炎等模型构建。

肺内雾化给药

图片来源：https://cn.bing.com/images

操作步骤

优点：定量气溶胶给到小鼠肺部，吸收效果好，操作方便；提高药物进入肺部的效率；
缺点：具有手术风险，包括出血、切口开裂等，容易注射到周围组织或者食管中。

百奥赛图药理药效部成功率达到100%！

血液样本采集要求

小鼠循环血容量：单位时间内通过心血管系统进入循环的血量，但不包括存储于肝、脾和淋巴血窦中或停滞于毛细血管中的血量。小鼠总循环血容量为动物体重的5.5-7.0%（55-70mL/kg）

※代表小鼠采血后的恢复时长

操作步骤

优点：简单，便于掌握，血流较快，伤口小，愈合快。成功率高，死亡率低；
缺点：需要麻醉，不能避免组织液的混入。

操作步骤

1.将小鼠保定好，暴露需采血一侧头部；
2.在如右图所示部位，找到颌下静脉丛血管位置，将采血针迅速刺入颌下静脉丛血管，可见血液流出；
3.采集到所需血量后，用无菌干棉球压迫止血。

操作步骤

操作步骤：

图片来源：https://bio-protocol.org/exchange/protocoldetail?id=1010353&type=1

操作步骤

1.小鼠仰卧固定，75%医用酒精喷撒胸腹部,打开胸腔,完全暴露心脏；
2.将生理盐水和福尔马林通过三通阀连接输液器，并在相应连接处做好标记，防止输错液体，出端连接10号不锈钢针，确认液体流出。
3.从心尖处入针，扎入动物左心室（如图D所示）。打开阀门，剪开动物右心耳。调生理盐水流速约每秒两到三滴，先快后慢，注入50-100 mL生理盐水；
4.质控点：动物肝脏，四肢变白，完成灌流；
5.内固定：旋转三通阀，使福尔马林液体通过输液器灌入小鼠体内，小鼠四肢及尾巴僵硬，即固定成功。

图片来源：Aparicio-Vergara M,. Methods Mol Biol. 2017;1639:161-171. doi: 10.1007/978-1-4939-7163-3_16.

1.使用麻醉剂对小鼠深度麻醉后置于操作板上，仰放在手术台上；
2.腹腔 U 形剪开，将腹腔内脏器移向躯体左侧，暴露胆管和肝门静脉；
3.分离胆管、插入胆管导管、固定；
4.分离门静脉、结扎肝脾分支，在门静脉近肝端与幽门静脉分支之间穿入手术丝线并打活套，做门静脉插管，迅速固定后开始灌流。
5.剪断下腔静脉腹腔段，迅速打开胸腔，在靠横膈一侧剪断下腔静脉胸腔段，冲去肝内残血；
6.将肝脏完整无损地分离出来，转移到灌流仪的脏器托盘上，或置于原位；
7.用PBS冲洗肝内残存血液。

操作步骤
1.选取适宜接种的肿瘤组织，修剪成2*2*2 mm³左右的瘤块；
2.将切分好的瘤块装入接种针；
3.接种针刺穿入小鼠皮肤，将瘤块接种到预定位置；
4.旋转接种针，针尖朝下出针，完成接种操作。

操作步骤
1.术前局部脱毛；
2.小鼠麻醉后，仰卧位放置，对手术区域皮肤进行消毒；
3.在第四对乳腺旁侧位置，剪一个约0.5 cm的创口，用无菌眼科镊轻轻夹起一侧乳腺，将细胞缓慢注入乳腺，稍作停顿，出针；
4.对伤口进行缝合消毒，将术后小鼠放在热台上，待其苏醒后放回笼盒中。

评价方法：成像、CT、生存期

操作步骤

操作步骤
1.术前局部脱毛；
2.小鼠麻醉后，仰卧位放置，对手术区域皮肤进行消毒；
3.横向剪开结肠区域皮肤及腹膜，暴露结肠，将注射针头刺入肠壁薄膜处，缓慢推入细胞悬液，注射完成后稍作停顿，缓慢出针，用棉签按压片刻后将结肠放回小鼠体内；
4.对伤口进行缝合消毒，将术后小鼠放在热台上，待其苏醒后放回笼盒中。

胰腺原位

操作步骤
1.术前局部脱毛；
2.小鼠麻醉后，右侧卧位放置，对手术区域皮肤进行消毒；
3.横向剪开脾脏区域皮肤及腹壁，分离出脾脏下的胰腺，将注射器针头较平行的刺入胰腺组织，注意不要刺穿，缓慢推入细胞悬液，注射完成后稍作停顿，缓慢出针，用棉签按压片刻后将胰腺及脾脏放回小鼠体内；
4.对伤口进行缝合消毒，将术后小鼠放在热台上，待其苏醒后放回笼盒中。

评价方法：成像、CT、生存期

数据采集-量瘤

成像数据分析

Lumina LT Inst，Series III

肝脏灌流

图片来源：Aparicio-Vergara M,. Methods Mol Biol. 2017;1639:161-171. doi: 10.1007/978-1-4939-7163-3_16.

1. 使用麻醉剂对小鼠深度麻醉后置于操作板上，仰放在手术台上；
2. 腹腔 U 形剪开，将腹腔内脏器移向躯体左侧，暴露胆管和肝门静脉；
3. 分离胆管、插入胆管导管、固定；
4. 分离门静脉、结扎肝脾分支，在门静脉近肝端与幽门静脉分支之间穿入手术丝线并打活套，做门静脉插管，迅速固定后开始灌流。
5. 剪断下腔静脉腹腔段，迅速打开胸腔，在靠横膈一侧剪断下腔静脉胸腔段，冲去肝内残血；
6. 将肝脏完整无损地分离出来，转移到灌流仪的脏器托盘上，或置于原位；
7. 用PBS冲洗肝内残存血液。