IBD模型介绍
炎症性肠炎( Inflammatory Bowel Disease, IBD)是结肠或胃肠道的非特异性慢性炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD),IBD的临床症状包括反复发作的腹泻、腹痛、肠出血/便血、发热,体重减轻。IBD的致病机理尚不明确,研究表明易感基因、免疫系统、外界环境和肠道微生物等多种因素均与疾病发生相关。目前有多种临床前小鼠模型用于研究IBD,基于不同诱导方法得到的疾病模型具有特定的用途。葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS)诱导的小鼠肠炎模型是使用最广泛的化学诱导小鼠IBD模型。通过将DSS溶于饮用水中诱发急性溃疡性肠炎或者慢性结肠炎,破坏小鼠肠上皮细胞,非特异性免疫细胞释放细胞因子,最终导致黏膜屏障的完整性遭到破坏,动物表现出明显的体重减轻、稀便、便血以及粒细胞浸润现象,在临床症状和病理特征上与人类的溃疡性结肠炎极其相似。
百奥赛图在不同背景小鼠上基于不同诱导方法建立了稳定的 IBD 疾病模型, 可用于炎症性肠炎的临床前研究和药效评价。
百奥赛图在C57BL/6小鼠中建立了稳定的DSS诱导的IBD模型,可用于炎症性肠炎的临床前研究和药效学评价。
模型制备示意图
Experimental Animals:C57BL/6, 7-8 weeks old, female
Modeling reagent:DSS
Modeling method:Dosing with DSS in drinking water for 7 consecutive days
临床评分
C57BL/6小鼠连续7天饮用含DSS的饮用水,全程记录体重变化,并进行临床评分。(A-C)各组动物体重变化趋势。(D)各组动物临床评分。实验数据显示,造模组(G2-DSS)相对于未造模组(G1-Vehicle),动物体重有所下降,且临床评分明显升高;给药组(G3-DSS-CsA low dose和G4-DSS-CsA high dose)的动物体重变化不明显,临床评分略有升高。这表明DSS诱发C57BL/6小鼠炎性肠病疾病模型造模成功,CsA对小鼠炎性肠病疾病模型的临床症状有缓解,并且呈现剂量依赖效应。
大体取材与结肠评价
DSS诱发C57BL/6小鼠炎性肠病疾病模型7天后,取结肠进行称重和测量长度。(A)结肠长度比较。(B)各组动物结肠重量与体重比值。(C)各组动物结肠重量与结肠长度比值。实验数据显示,造模组(G2-DSS)相对于未造模组(G1-Vehicle),结肠重量和长度明显异常;给药组(G3-DSS-CSA low dose和G4-DSS-CSA high dose)的结肠重量和长度相对较好。这表明CsA对DSS诱发小鼠炎性肠病疾病模型的结肠症状有所缓解。
病理分析
取DSS诱发C57BL/6小鼠炎性肠病疾病模型的结肠,将组织切片进行病理检测。(A)各组动物结肠H&E染色图示。(B)各组动物结肠病理评分。实验数据显示,造模组(G2-DSS)相对于未造模组(G1-Vehicle),肠上皮细胞受到破坏,肠道黏膜层完整性遭到破坏,炎性细胞大量浸润;而给药组(G3-DSS-CSA low dose和G4-DSS-CSA high dose)的结肠症状明显缓解,且表现出剂量效应。
综合临床评分、大体取材和结肠评价、病理分析结果,表明DSS诱发C57BL/6小鼠炎性肠病疾病模型造模成功,环孢菌素A(CsA)能够显著缓解DSS诱发炎性肠病结肠病损,且表现出剂量效应。
参考文献:
1. Elson, C.O., Sartor, R.B., Tennyson, G.S. & Riddell, R.H. Experimental models of inflammatory bowel disease. Gastroenterology 109, 1344-1367 (1995).
2. Kiesler, P., Fuss, I.J. & Strober, W. Experimental Models of Inflammatory Bowel Diseases. Cell Mol Gastroenterol Hepatol 1, 154-170 (2015).
3. Mourad, F.H., Yau, Y., Wasinger, V.C. & Leong, R.W. Proteomics in Inflammatory Bowel Disease: Approach Using Animal Models. Dig Dis Sci 62, 2266-2276 (2017).
百奥赛图在C57BL/6小鼠中建立了稳定的TNBS诱导的IBD小鼠模型,可用于炎症性肠炎的临床前研究和药效学评价。
模型建立
Experimental Animals:C57BL/6N, 7-10 weeks old, female
Detection Indicator:Body Weight, Colon Weight, Colon length
Modeling reagent:TNBS (trinitrobenzene sulfonate)
CD4-GK1.5-mlgG2a在IBD(野生型C57BL/6)小鼠模型中的药效验证
CD4-GK1.5-mlgG2a对TNBS诱导的急性肠道炎症的影响。动物在第0天用TNBS溶液预致敏,然后在第7天接受TNBS直肠内给药。每天记录体重。第6天腹腔注射CD4-GK1.5-mIgG2a (3, 10 mg/kg)。第10天处死小鼠,记录结肠重量(A)和长度(B),计算结肠重量、体质量比(D-F)。
百奥赛图在C57BL/6小鼠中建立了稳定的CD4+CD45RB high T细胞诱导的IBD模型,可用于炎症性肠炎的临床前研究和药效学评价。
模型建立
Experimental Animals:SCID mice, 9-11 weeks old, female
Detection Indicator:Body Weight, Colon Weight, Colon length
Modeling reagent:CD4+CD45RB high T cell
每天记录IBD小鼠模型的初始体重百分比、临床评分和粪便性状。
Gross Sampling and Histologic Assessment of colon of IBD model
IBD小鼠的大体解剖和结肠重量与长度比值的代表性图片。值表示为平均值±SEM,**<0.01。
CD4+CD45RB high T细胞诱导的IBD模型肠道病理组织切片代表图片。