为了纪念世界血友病联盟发起人─加拿大籍的法兰克·舒纳波先生（Mr.Frank Schnabel）对于血友病患的贡献，为了唤起大众对于血友病的正确认知，为了让各界人士能够更多的了解和关爱血友病患者，自1989年起，特别选中他的生日4月17日作为世界血友病日。

血友病（Hemophilia）是一种持续终生的一组凝血因子缺乏导致凝血功能障碍的遗传性出血性疾病，呈X染色体连锁隐性遗传。在19世纪的欧洲因其肆虐于贵族而被称为“皇室病”。目前，我国人群患病率为2.73/10万，有登记的血友病患者约4万例。因体内天生缺少特定的凝血因子，终生伴随着“血流不止”的痛苦，被称为“玻璃人”。血友病可分为：血友病 A（凝血因子Ⅷ缺乏症）和血友病B（凝血因子Ⅸ缺乏症），所有血友病患者中，血友病A占80%~85%，血友病B占15%~20%。血友病在儿童早期即可被诊断出来，主要症状为关节、肌肉和深部组织出血等，反复关节出血导致患儿逐渐出现关节活动障碍、关节畸形、假肿瘤形成等。^[1]

血友病主要特征

血友病目前无法根治，较为有效的治疗手段是凝血因子替代治疗，即通过补充缺乏的凝血因子，以达到止血或者预防出血的目的，简单讲就是“缺啥补啥”。此外还有新兴的非因子替代治疗和基因治疗。前者通过抑制凝血途径中的抗凝血酶（因子），从而达到止血或预防出血的目的。后者作为唯一有可能治愈血友病的方法，其基本原理是将修饰后的正常凝血因子编码基因通过合适的载体转导致血友病患者体内，恢复原缺陷基因的持续表达。^[2，3]

新兴药物

罗氏公司的Hemlibra（Emicizumab，艾美赛珠单抗）是第一款治疗血友病的全新靶点的生物制剂。是一种靶向IXa和X因子的双特异性抗体。于2017年11月首次被FDA批准上市并于2018年被FDA扩增新适应症，用于存在凝血因子VIII抑制物的A型血友病成人和儿童患者的常规预防性治疗，以防止出血或降低出血发生的频率。于2018年12月在中国获得批准，商品名舒友立乐。

辉瑞公司的HYMPAVZI（Marstacimab，马塔西单抗）是第二款治疗血友病的全新靶点的生物制剂。是一种靶向组织因子途径抑制物（tissue factor pathway inhibitor，TFPI）的人源IgG1单克隆抗体。于2024年10月获美国FDA批准用于常规预防或减少12岁及以上A型血友病和B型血友病成人和儿童患者的出血，这些患者体内不含凝血因子VIII与IX抑制剂（中和抗体）。根据新闻稿，该疗法是美国首款只需每周一次皮下注射的B型血友病疗法。

临床前和临床研究的联合有助于创新药物研发，使用动物模型可以探索疾病的发病过程，评估症状和并发症，是衔接基础研究与临床应用的重要工具。百奥赛图开发了一系列针对血友病相关靶点人源化小鼠模型，助力该疾病药物临床前药物研究。

B-hSERPINE2 mice

作用机制

PN-1（SERPINE2）在止血和血管生物学中的作用。SERPINE2是血管生理学中重要的调节因子。SERPINE2在血栓形成或纤维蛋白溶解中起重要作用。^[4]

蛋白表达分析

纯合B-hSERPINE2小鼠SERPINE2蛋白表达的Western blot分析。收集野生型C57BL/6小鼠和纯合B-hSERPINE2小鼠的组织裂解物，用种属特异性抗serpine2抗体进行western blot分析。每个样本加载40 μg总蛋白进行Western blot分析。脑、脾、肺、卵巢均检测到SERPINE2。

B-hTFPI mice

分子机制和信号通路

TFPI抑制TF依赖性凝血的示意图。在形成TF/FVIIa复合物后，循环的酶原FX与TF/FVIIa结合（1），随后被激活（2）。一旦激活，FXa可能从激活复合物中解离（3a） 。FXa随后可发挥其促凝血功能，或者通过其第二Kunitz结构域被细胞相关或血浆TFPI灭活。该复合物现在可以重新与TF/FVIIa结合（4），TFPI的第一Kunitz结构域与FVIIa的活性位点结合。尽管通常被描述为两阶段过程，动力学研究更倾向于一种模型，即TFPI在TF-FVIIa/FXa释放之前结合并使其失活（3b/4）。在每种情况下，最终形成相同的非活性四聚体复合物。^[5]

蛋白表达分析

通过ELISA法对野生型（WT）小鼠和B-hTFPI小鼠的种属特异性TFPI表达进行分析。采集野生型C57BL/6小鼠和纯合B-hTFPI小鼠血浆，采用TFPI ELISA试剂盒进行ELISA分析。小鼠TFPI仅在野生型小鼠中检测到。由于抗体的交叉反应性，在纯合B-hTFPI小鼠和野生型小鼠中检测到TFPI。ND：未确定。

B-hFIX mice

作用机制

在血友病A或B中，凝血因子VIII（FVIII）或因子IX（FIX）的缺乏导致凝血级联反应中凝血酶的产生不足。凝血酶的缺乏最终会损害形成纤维蛋白凝块的能力，导致出血。^[6]

B-hFIX小鼠的功能分析

野生型C57BL/6JNifdc小鼠和纯合人源化B-hFIX小鼠的血凝分析。采集野生型C57BL/6JNifdc小鼠和纯合B-hFIX小鼠（雄性，9周龄，n=3）的血浆。纯合B-hFIX小鼠与野生型小鼠APTT值无显著差异。APTT：活化部分凝血活素时间。

血浆蛋白表达分析

ELISA法分析FIX在野生型C57BL/6JNifdc小鼠和纯合人源化B-hFIX小鼠中的种属特异性表达。采集野生型C57BL/6JNifdc小鼠(雄性，9周龄，n=3, +/Y；雌性，11周龄，n=3, +/+)和纯合B-hFIX小鼠(雄性，9周龄，n=3, H/Y；母，11周龄，n=3, H/H)血浆。ELISA（Abcam, ab188393）检测FIX蛋白表达水平。人FIX仅在雄性(A)和雌性(B)纯合B- hfix小鼠中检测到。

血友病相关模型

从替代疗法到基因疗法的转变，预示着血友病治疗进入了一个新的时代，血友病患者的治疗前景越来越光明。随着科技的不断进步，也将不断涌现出新技术和新治疗方法为患者带来前所未有的希望。

参考资料：

[1]  杨仁池. 中国血友病管理指南 [M] .第2021版.北京. 中国协和医科大学出版社, 2021.

[2]  杨仁池. 中国血友病管理指南 [M] .第2024版.北京. 中国协和医科大学出版社, 2024.

[3]王健琨,黄锦雄.血友病诊治现状与进展[J].中外医学研究,2021,19(09):191-194.

[4]Bouton, M.-C.; Boulaftali, Y.; Richard, B.; Arocas, V.; Michel, J.-B.; Jandrot-Perrus, M.. (2012). Emerging role of serpinE2/protease nexin-1 in hemostasis and vascular biology. , 119(11), 2452–2457. doi:10.1182/blood-2011-10-387464

[5]Crawley JT, Lane DA. The haemostatic role of tissue factor pathway inhibitor. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2008 Feb;28(2):233-42. doi: 10.1161/ATVBAHA.107.141606. Epub 2007 Oct 19. PMID: 17951326.

[6]Erik Berntorp;Kathelijn Fischer;Daniel P. Hart;Maria Elisa Mancuso;David Stephensen;Amy D. Shapiro;Victor Blanchette;. (2021). Haemophilia . Nature Reviews Disease Primers, (), –. doi:10.1038/s41572-021-00278-x