小鼠是生物学研究中最常用的动物模型之一。在许多领域,如癌症、心血管疾病和神经科学等方面,小鼠被广泛应用于基础和转化医学研究。在这些实验中,给药是一个非常重要的步骤。所以,正确地给药是保证实验结果的准确性和可靠性的重要要素。
本文将会介绍几种常见的实验动物给药方法。
注射给药
注射给药包括静脉注射,腹腔注射,肌肉注射,皮下注射,皮内注射等方法。
01、皮下注射
将药液推入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收后进入血液循环。操作时,需要消毒注射部位的皮肤,然后将皮肤提起,注射针头取钝角角度刺入皮下,把针头轻轻左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻回抽,若无回血,则可缓慢将药物注入皮下。拔针时捏住进针部位片刻,以防止药物外漏。
02、皮内注射
将药液注入皮肤的表层与真皮之间。可用于观察皮肤血管通透性变化或皮内反应,多用于接种、过敏实验等。操作时,需将注射的部位局部脱毛、消毒,然后用左手将皮肤捏成皱襞,右手持针头,将针头与皮肤呈30°角,沿表层刺入皮,慢慢注入一定量的药液。此时会感到有很大的阻力,并且注射部位皮肤表面马上呈小丘疹状隆起,皮肤表面上的毛孔极明显。如无以上表现,则药液可能注入皮下,应更换部位重新注射。
03、肌肉注射
肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选小鼠大腿外侧。注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽如无回血,即可进行注射。肌肉注射主要用于注射不溶于水而悬于油或其他剂型中的药物。注射完毕后可用手轻轻按摩注射部位,促进药液吸收。
04、腹腔注射
左手抓取并固定小鼠,使小鼠腹部朝上,鼠头略低于鼠尾,右手持注射器将针头刺入下腹部腹白线稍左侧或稍右侧的皮下,针头向前推进3mm左右,接着使注射针头与皮肤呈45°穿过腹肌进入腹腔,进入后无抵抗感,固定针头保持针尖不动,回抽若无回血肠液以及尿液则可注射药物。
05、静脉注射
大、小鼠尾静脉共有3根(左、中、右),一般常选用两侧的静脉。注射前,先把动物固定在暴露尾部的鼠尾固定器内,拔去尾部静脉走向的毛,用75%酒精棉球反复擦拭鼠尾,以达到消毒、血管扩张及软化表皮角质的目的。尽量从静脉的远心端刺入血管,回一下血,将药液缓慢注入。注射完毕,用棉球压住针眼,拔去针头,继续压迫数分钟。
消化道给药
消化道给药包括口服给药,灌胃给药,十二指肠给药,直肠给药等。其中最为常见的为灌胃给药。
01、口服给药
通常通过将液体或固体溶解在水中并放入喂食器中进行。当然也可以直接将固体颗粒混合到食物里面。这种方法适用于大多数化合物和制剂,并且很容易操作。一般适用于对动物疾病的防治或与食物有关的人类疾病动物模型的制备。
02、灌胃给药
借助器械(灌胃针)将药物溶液或混悬液直接灌入动物胃内。一般灌胃给药在空腹时给予吸收较快,也较完全。小鼠灌胃量为0.1mL/10g体重,最大耐受量为1mL/只。具体操作如下:
固定动物
按正确方法用左手抓取和固定动物。使腹部朝上,颈部拉直。
插入灌胃针头
固定后,右手持接灌胃针的注射器吸取药液,将针头从口角插入口腔内,然后用灌胃针头压其头部,使口腔与食管成一直线,再将灌胃针头沿上腭壁轻轻进入,转动针头刺激动物吞咽,然后沿咽后壁慢慢插入食道。
若动物挣扎厉害,应退出灌胃针,待动物安静后重新插入。切不可强行插入,以免损伤食道或误入气管导致动物死亡。
灌药
当感觉有落空感时表明灌胃针可能进入胃内,向外抽动注射器活塞,感觉有负压说明灌胃针未插入气管,此时可将药液灌入。
拔去灌胃针
灌胃完毕后,轻轻拔出灌胃针。
局部给药
局部给药包括皮肤给药,脑内给药,关节腔内给药,阴道给药,眼内给药。
01、皮肤给药
主要用于研究毒物或药物经过皮肤的吸收效果和对皮肤的局部作用、致敏作用和光感作用等。大小鼠的皮肤给药主要是通过浸尾的方式进行,从而判断药物经皮吸收作用。
02、脑内给药
常用于与微生物,疫苗有关的实验动物。啮齿类动物给药时,由鼠正中额部刺入脑内,注入药物或接种物。
呼吸道给药
呼吸道给药包括鼻腔内给药和气管内给药。粉尘或喷雾使用的药物,或需要通过气溶胶感染的方式进行微生物感染动物实验时,就需要通过动物呼吸道给药。
注射法是最常见的给药方式之一。通常使用针头将溶液直接注入静脉、肌肉或腹腔内。其中,静脉注射可以快速达到高浓度的效果;而肌肉注射则比较适合长时间作用的制剂;至于腹腔内注射,则可以避免创伤对身体造成不良影响。
然而,由于操作难度较大且容易引起感染等问题,因此需要专业人员进行操作,并采取相应安全措施。
总结
在给小鼠给药时,需要根据具体情况从而选择合适的方法,并注意正确地操作。同时,在进行实验前也应该充分了解所使用药物的性质、作用机理及其潜在不良反应等。
最后,致敬所有为人类科学研究献身的实验动物。
参考资料
[1]秦川, 魏泓. 实验动物学[J]. 人民卫生出版社, 2015.
[2] Machholz E , Mulder G , Ruiz C , et al. Manual restraint and common compound administration routes in mice and rats.[J]. Journal of visualized experiments : JoVE, 2012(67).