异常的脂质循环和存储是导致心血管疾病和代谢性疾病的风险因素。富含TG（triglycerides，甘油三酯）的脂蛋白（如VLDL，乳糜微粒）在脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用下将TG水解成为自由脂肪酸（FFA），进而被不同组织摄取和利用。因此，LPL对于TG代谢和脂肪分布具有重要作用，而LPL的活性受ANGPTL3, 4, 8的调节^[1]。

ANGPTL（Angiopoietin-like proteins，血管生成素样蛋白）家族包括8个成员，是分泌型糖蛋白，具有3个保守的结构域，即N端的信号肽、coiled-coil结构域（CCD）和C端fibrinogen-like结构域（FLD）；只有ANGPTL8例外，它没有C端的FLD。对于ANGPTL3, 4, 8来说，它们都具有LPL和内皮脂肪酶（EL）的抑制结构域（specific epitope1, SE1）。

图1. ANGPTL家族蛋白结构域^[2]

ANGPTL3主要在肝脏中表达，可抑制LPL和EL的酶活性，从而抑制TG水解，也就是抑制VLDL/乳糜微粒向TG含量低的脂蛋白（LDL, HDL）的转换，于是血浆中VLDL水平升高，可引发动脉粥样硬化斑块的产生。另一方面，ANGPTL3的FLD可与α5β3整合素结合，引发斑块新生血管、内膜增厚和炎症等。目前为止，三类ANGPTL3抑制剂药物在开发中，分别是单抗，反义寡核苷酸（ASO）和CRISPR/Cas9基因编辑，它们可促进VLDL的水解。已有的PCSK9抑制剂可促进LDL受体循环，增强肝脏摄取LDL并抑制肝脏分泌VLDL。由于ANGPTL3抑制剂与PCSK9抑制剂的作用机制不同，二者可能具有协同治疗冠心病（CHD）的作用。

图2. ANGPTL3的生物学功能及其抑制剂药物的工作机制^[3]

ANGPTL3的活性依赖ANGPTL8的活化，但相对稳定，不受营养状况的影响。而ANGPTL4和ANGPTL8的水平受进食状况的影响，且呈相反的关系。

禁食或运动状态下，ANGPTL4表达上调（ANGPTL8下调），使WAT中LPL的活性减弱。于是，循环中的TG就进入外周组织（如心脏和肌肉）被利用。

ANGPTL3/8复合物分泌入血，可抑制循环系统、以及氧化组织（如心脏、肌肉）中的LPL活性。喂食状态下，ANGPTL8上调（ANGPTL4下调），使得心脏和肌肉中的LPL活性受ANGPTL3/8抑制，进而使得循环中的TG进入白色脂肪组织（WAT）存储起来。

总的来说，ANGPTLs可调节LPL活性，在禁食条件下促进TG被外周组织的利用，并在进食状态下促进脂质存储^[4]。

图3. ANGPTL3, 4, 8在不同营养状况下调节血脂的工作机制^[1]

ANGPTL3，4，8相关药物

ANGPTL3是一个值得期待的心血管疾病靶点。2021年2月，FDA批准再生元的依维库单抗（evinacumab, anti-hANGPTL3 antibody）治疗家族性高胆固醇血症，这是此类药物中首个被批准上市的（first-in-class）。依维库单抗可降低甘油三酯，用于治疗纯合子家族性高胆固醇血症(HoFH)患者，增加循环中含apoB的脂蛋白的清除率来降低LDL。另外，还有一些开发靶向ANGPTL3的创新疗法的药物，其中比较领先的是辉瑞从Akcea 和 Ionis处获得全球独家许可的Vupanorsen。Vupanorsen作为ANGPTL3的反义寡核苷酸，能够通过抑制ANGPTL3合成，提高脂蛋白脂肪酶（LPL）的活性，从而降低富含TG脂蛋白（TRL）水平。国内也已开始对ANGPTL靶点进行药物研发，如苏州瑞博生物正在开发靶向ANGPTL3的siRNA抑制剂。

活跃在研的ANGPTL8药物只有一款礼来公司的LY-3475766，处于临床I期。这是一款单克隆抗体药物，靶向ANGPTL3/8复合物，可显著降低血脂异常病人血浆中的TG和残存胆固醇含量。靶向ANGPTL4的药物主要有再生元开发的单克隆抗体REGN-1001和Lexicon医药开发的14D12单抗，均用于降血脂。

为助力调控脂质代谢的药物开发，百奥动物自主研发了ANGPTL3, 4, 8的人源化小鼠。

B-hANGPTL3 mice

品系名称：C57BL/6-Angptl3tm1(ANGPTL3)/Bcgen

背景：C57BL/6

产品编号：112224

蛋白表达分析

用ELISA分析杂合B-hANGPTL3小鼠中ANGPTL3蛋白的种属特异性表达。取野生型C57BL/6小鼠和杂合B-hANGPTL3小鼠的血浆进行分析。mANGPTL3的表达在两种鼠中均可检测到，而hANGPTL3的表达只在杂合B-hANGPTL3小鼠中检测到，野生型小鼠中检测不到。

B-hANGPTL3 mice plus

品系名称：C57BL/6-Angptl3tm4(ANGPTL3)/Bcgen

背景：C57BL/6

产品编号：112523

B-hANGPTL3 mice plus小鼠中的mANGPTL3基因（包括3'UTR）被替换为hANGPTL3基因（包括3'UTR），拟用于针对3'UTR设计的核酸药物评估。

蛋白表达分析

用ELISA分析纯合B-hANGPTL3 mice plus小鼠中ANGPTL3蛋白的种属特异性表达。取野生型C57BL/6小鼠和纯合B-hANGPTL3 mice plus小鼠的血浆进行分析。mANGPTL3的表达在野生型小鼠中可检测到。hANGPTL3的表达只在纯合B-hANGPTL3 mice plus小鼠中检测到，野生型小鼠中检测不到。

B-hANGPTL4 mice

品系名称：C57BL/6N-Angptl4tm1(ANGPTL4)/Bcgen

背景：C57BL/6N

产品编号：111085

mRNA表达分析

用RT-PCR分析纯合B-hANGPTL4小鼠中ANGPTL4基因的种属特异性表达。mANGPTL4 mRNA的表达仅在野生型小鼠的脂肪组织中检测到，而hANGPTL4 mRNA的表达只在纯合B-hANGPTL4小鼠中检测到，野生型小鼠中检测不到。

蛋白表达分析

用western blot分析纯合B-hANGPTL4小鼠中ANGPTL4蛋白的种属特异性表达。取野生型小鼠和纯合B-hANGPTL4小鼠的脂肪组织进行western blot分析。ANGPTL4的表达在两种鼠中均可检测到，因为ANGPTL4可种属交叉识别。并且，对于两种鼠来说，ANGPTL4的表达量在禁食状态下更高。

B-hANGPTL8 mice

品系名称：C57BL/6N-Angptl8tm1(ANGPTL8)/Bcgen

背景：C57BL/6N

产品编号：111230

mRNA表达分析

用RT-PCR分析纯合B-hANGPTL8小鼠中ANGPTL8基因的种属特异性表达。mANGPTL8 mRNA的表达仅在野生型小鼠中检测到，而hANGPTL8 mRNA的表达只在纯合B-hANGPTL8小鼠中检测到，野生型小鼠中检测不到。

蛋白表达分析

用ELISA分析纯合B-hANGPTL8小鼠中ANGPTL8蛋白的种属特异性表达。取野生型C57BL/6小鼠和纯合B-hANGPTL8小鼠的血浆进行ELISA分析。ANGPTL8的表达在两种鼠中均可检测到，因为抗体可种属交叉识别。

参考文献

1. Sylvers-Davie KL, Davies BSJ. Regulation of lipoprotein metabolism by ANGPTL3, ANGPTL4, and ANGPTL8. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2021;321(4):E493-E508. doi:10.1152/ajpendo.00195.2021

2. Carbone C, Piro G, Merz V, et al. Angiopoietin-Like Proteins in Angiogenesis, Inflammation and Cancer. Int J Mol Sci. 2018;19(2):431. Published 2018 Feb 1. doi:10.3390/ijms19020431

3. Rhee JW, Wu JC. Dyslipidaemia: In vivo genome editing of ANGPTL3: a therapy for atherosclerosis?. Nat Rev Cardiol. 2018;15(5):259-260. doi:10.1038/nrcardio.2018.38

4. Aryal, Binod et al. “ANGPTL4 in Metabolic and Cardiovascular Disease.” Trends in molecular medicine vol. 25,8 (2019): 723-734. doi:10.1016/j.molmed.2019.05.010