泛癌治疗潜力靶点-Trop2|BioMice百奥动物

Trop2 (Trophoblast Cell-Surface Antigen 2 )是一种糖蛋白，最初被描述为滋养细胞的表面标志物，但随后科学家发现 Trop2 在许多实体瘤中表达增高，在正常组织中表达降低。具体来说，宫颈癌、三阴乳腺癌和尿路上皮癌中的 Trop2中高表达率分别高达89%、88%和83%，在肺鳞癌、子宫内膜癌、前列腺癌、结直肠癌等常见癌症中也有很高的中高表达率。这使得 Trop2 靶向治疗有望成为一个泛癌种的疗法，针对 Trop2 所开发的抗体药物目前已有上市，其治疗潜力越来越得到广泛的认可。

表1.Trop2靶点药物研发进展

数据来源：公开信息整理

2022年美国癌症研究协会（AACR）年会中，百奥赛图在会议上公布了其Her2xTrop2全人双抗ADC（YH012）的临床前研究进展。YH012在非小细胞肺癌和胃癌CDX小鼠模型体内均显示出良好的抗肿瘤活性。

除此之外，启德药业的GQ-1003也同样处于临床前阶段，石药集团、洛启生物、豪森药业等也拥有 Trop2 抗体专利。

Trop2的作用机制

Trop2 是由TACSTD2基因编码的细胞表面糖蛋白，与肿瘤的发生和发展关系密切。研究发现，在人体不同的组织中，Trop2 表达水平不同。在肿瘤细胞中，Trop2 的表达明显升高，并通过调节钙离子信号通路、细胞周期蛋白表达及降低纤黏蛋白黏附作用促进肿瘤细胞生长、增殖和转移。此外，Trop2 也可以与Wnt信号级联中的β-连环蛋白相互作用，因而对细胞核癌基因的转录、细胞的增殖起作用。总的来说，Trop2 的高表达与癌细胞的增殖、侵袭、转移扩散息息相关，造成肿瘤患者生存期大幅缩短。

图1:Trop2 的信号通路^[1]

Trop2 作为广谱肿瘤标志物，市场前景广阔。BioMice百奥动物自主研发的B-hTROP2 mice、B-hCD28/hTROP2 mice、B-hCD3EDG/hTROP2 mice、B-hTROP2 MC38 plus 细胞系助力靶向 Trop2 药物开发，为临床前药效评估提供了优质模型。

B-hTROP2 mice

基本信息

蛋白表达分析

利用western blot检测纯合B-hTROP2小鼠中种属特异性TROP2的表达。取野生型小鼠(+/+)和纯合B-hTROP2小鼠(H/H)的皮肤和肾脏组织，用抗TROP2抗体进行western blot分析。在野生型小鼠(+/+)中检测到鼠TROP2；人TROP2只能在纯合B-hTROP2小鼠(H/H)和B-hTROP2 MC38细胞系中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

脾脏中白细胞亚群分析

利用流式细胞术分析纯合B-hTROP2小鼠和野生型小鼠脾脏中白细胞亚群（如图），结果显示纯合B-hTROP2小鼠的白细胞亚群百分比与野生型小鼠相似，表明人源化TROP2不会改变白细胞亚群在脾脏中的整体发育、分化或分布。

脾脏中T细胞亚群分析

利用流式细胞术分析纯合B-hTROP2小鼠和野生型小鼠脾脏中T细胞亚群（如图），结果显示纯合B-hTROP2小鼠与野生型小鼠中各T细胞亚群的百分比相似，表明人源化TROP2不会改变T细胞亚群在脾脏中的整体发育、分化或分布。

另外，实验表明人源化TROP2亦不会改变白细胞亚群及T细胞亚群在淋巴结、外周血中的整体发育、分化或分布。

B-hCD28/hTROP2 mice

基本信息

蛋白表达分析

利用流式细胞术检测纯合B-hCD28/hTROP2小鼠中种属特异性CD28的表达。取野生型小鼠(+/+)和纯合B-hCD28/hTROP2小鼠(H/H)的脾脏细胞，用抗CD28抗体进行流式细胞术分析。在野生型小鼠(+/+)中检测到鼠CD28；人CD28只能在纯合B-hCD28/hTROP2小鼠(H/H)中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

利用western blot检测纯合B-hCD28/hTROP2小鼠中种属特异性TROP2的表达。取野生型小鼠(+/+)和纯合B-hCD28/hTROP2小鼠(H/H)的皮肤组织，用抗TROP2抗体进行western blot分析。在野生型小鼠(+/+)中检测到鼠TROP2；人TROP2只能在纯合B-hCD28/hTROP2小鼠(H/H)和B-hTROP2 MC38细胞系中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

B-hCD3EDG/hTROP2 mice

基本信息

蛋白表达分析

利用流式细胞术检测纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠中种属特异性CD3E的表达。取野生型小鼠(+/+)和纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠(H/H;H/H)的脾脏细胞，用抗CD3E抗体进行流式细胞术分析。在野生型小鼠(+/+)中检测到鼠CD3E；人CD3E只能在纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠(H/H;H/H)中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

利用western blot检测纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠中种属特异性TROP2的表达。取野生型小鼠(+/+)和纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠(H/H;H/H)的皮肤组织，用抗TROP2抗体进行western blot分析。在野生型小鼠(+/+)中检测到鼠TROP2；人TROP2只能在纯合B-hCD3EDG/hTROP2小鼠(H/H;H/H)和B-hTROP2 MC38细胞系中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

B-hTROP2 MC38 plus

基本信息

蛋白表达分析

利用流式细胞术分析人TROP2在B-hTROP2 MC38 plus细胞系中的表达。野生型MC38和B-hTROP2 MC38 plus培养的单细胞悬液用种属特异性抗TROP2抗体染色。B-hTROP2 MC38 plus细胞表面检测到人TROP2，而野生型MC38细胞表面未检测到人TROP2。B-hTROP2 MC38 plus细胞的3-B10克隆用于体内肿瘤生长试验。

肿瘤生长曲线与体重变化

将B-hTROP2 MC38 plus细胞(5×105)和野生型MC38细胞(5×105)皮下植入C57BL/6小鼠(雌性，7周龄，n=5)。每周测量两次肿瘤体积和体重。(A)平均肿瘤体积±SEM。(B)体重(Mean±SEM)。体积以mm3表示，公式为:V=0.5 ×长径×短径2。如图A所示，B-hTROP2 MC38 plus细胞能够在体内形成肿瘤，可用于药效研究。

参考文献

[1] Shen M, Liu S, Stoyanova T. The role of Trop2 in prostate cancer: an oncogene, biomarker, and therapeutic target[J]. American journal of clinical and experimental urology, 2021, 9(1): 73.