2022年1月11日，被誉为“全球医疗投资领域行业风向标” 的JPMorgan医疗健康大会（简称：JPM）在线上召开，制药巨头、医药新锐、投资人聚集一堂。科望医药在JPM大会上系统介绍了其抗CD39抗体药物ES002。这是全球第四款、中国公司中首款进入临床研究阶段的抗CD39抗体，靶向CD39目前是免疫肿瘤学中最有前景的方法之一。

关于CD39

 CD39是一种细胞膜蛋白，属于胞外核苷酸三磷酸盐二磷酸水解酶家族，具有ATP酶和二磷酸腺苷（ADP）酶活性，将胞外ATP和ADP水解为单磷酸腺苷（AMP），从而限制免疫反应。

 研究发现，在肿瘤微环境内，抑制CD39可以抑制胞外ATP（eATP）的降解，从而提高eATP的水平。而eATP可以作用于表达P2X7的巨噬细胞，促进炎性因子的释放和P2X7阳性巨噬细胞的焦亡。此外，eATP还可以增强表达P2X7的DC细胞的抗原呈递功能以及其炎性细胞因子的释放。另一方面，抑制CD39还可以降低腺苷（ADO）的产生，从而解除对多种免疫细胞的免疫抑制作用，恢复它们的肿瘤杀伤功能。总的来说，这些机制主要通过增加eATP，或减少ADO生成来发挥作用。

图1: CD39靶向药作用机制^[1]

CD39 部分在研药物

 TTX-030是Tizona公司开发的一款CD39靶向单克隆抗体，目前，TTX-030正在进行两项临床研究：和AbbVie合作进行1/1b期临床研究（NCT03884556），在患有晚期癌症的成人中作为单一疗法或与已批准的抗PD-1药物和标准化疗联合使用；以及TTX-030与免疫疗法和/或标准化学疗法联合使用1/1b期临床研究（NCT04306900），以评估安全性，耐受性，药代动力学，药效动力学和抗肿瘤活性。

 SRF617是Surface Oncology公司开发的一款CD39抑制剂，2021年3月被FDA授予治疗胰腺癌的孤儿药资格。小鼠试验模型中已验证，SRF617与PD-1单抗有协同肿瘤抑制效果。目前，Surface Oncology正在美国和加拿大开展SRF617联合Keytruda、吉西他滨、白蛋白结合型紫杉醇治疗胰腺癌的1期临床试验。

 IPH5201是Innate Pharma公司开发的一款CD39靶向的人源化单克隆抗体，可选择性结合并抑制膜结合CD39和可溶性人源CD39的活性。目前，该药正在开展一项开放标签、剂量递增的1期临床试验，该研究旨在晚期实体瘤中评估IPH5201作为单药，或与durvalumab（PD-L1单抗）±oleclumab（CD73单抗）联合的安全性、耐受性、抗肿瘤活性和药代动力学。

 BioMice百奥动物自主开发了B-hCD39 mice，B-hPD-1/hCD39 mice，B-hCD73/hCD39 mice，助力CD39靶向药物研发。

B-hCD39 mice 介绍

01 蛋白表达分析

 利用流式细胞术分析纯合B-hCD39小鼠特异性CD39的表达。取野生型小鼠和B-hCD39纯合小鼠的脾细胞，用CD39抗体流式细胞术分析。在野生型小鼠中检测到鼠Cd39；人CD39只能在纯合B-hCD39小鼠中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

02 脾脏中白细胞亚群分析

 利用流式细胞术分析纯合B-hCD39小鼠和野生型小鼠脾脏中白细胞亚群（如图），结果显示纯合B-hCD39小鼠的白细胞亚群百分比与野生型小鼠相似，表明人源化CD39不会改变白细胞亚群在脾脏中的整体发育、分化或分布。

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03 脾脏中T细胞亚群分析

 利用流式细胞术分析纯合B-hCD39小鼠和野生型小鼠脾脏中T细胞亚群（如图），结果显示纯合B-hCD39小鼠与野生型小鼠中各T细胞亚群的百分比相似，表明人源化CD39不会改变T细胞亚群在脾脏中的整体发育、分化或分布。

 另外，实验表明人源化CD39亦不会改变白细胞亚群及T细胞亚群在淋巴结、外周血中的整体发育、分化或分布。

04 药效验证

 (A)抗人CD39抗体抑制B-hCD39小鼠MC38肿瘤生长。小鼠结肠癌MC38细胞皮下植入纯合B-hCD39小鼠(n=6)。当肿瘤体积达到约190 mm3时，小鼠被分组，然后用抗人CD39抗体给药。(B)治疗期间体重变化。如A图所示，抗人CD39抗体对B-hCD39小鼠肿瘤生长起到有效的控制作用，且具有剂量依赖性。B-hCD39小鼠为抗人CD39抗体的体内评估提供了一个强有力的临床前模型。数值以平均值±SEM表示。(所有抗体均由客户提供)

B-hPD-1/hCD39 mice 介绍

01 蛋白表达分析

 采用流式细胞术分析种属特异性PD-1和CD39在纯合B-hPD-1/hCD39小鼠中的表达。取野生型小鼠和纯合B-hPD-1/hCD39小鼠的脾细胞，采用特异性抗PD-1和抗CD39抗体流式细胞术分析。野生型小鼠可检测到鼠Pd-1和Cd39；人PD-1和CD39只能在纯合B-hPD-1/hCD39小鼠中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

 采用流式细胞术分析种属特异性PD-1和CD39在纯合B-hPD-1/hCD39小鼠中的表达。用抗CD3E抗体作用后，从野生型小鼠和B-hPD-1/hCD39小鼠体内取脾细胞，用特异性的抗PD-1和抗CD39抗体进行流式细胞术分析。野生型小鼠可检测到鼠Pd-1和Cd39；人PD-1和CD39只能在纯合B-hPD-1/hCD39小鼠中检测到，而不能在野生型小鼠中检测到。

02 药效验证

 (A)抗人CD39抗体联合抗人PD -1抗体抑制B-hPD-1/hCD39小鼠MC38肿瘤生长。小鼠结肠癌MC38细胞皮下植入纯合B-hPD-1/hCD39小鼠(雌性，7-8周龄，n=6)。当肿瘤体积达到大约100- 150 mm3时，小鼠被分组，然后用抗人CD39抗体SRF367A(内部制备)联合抗人PD -1抗体Keytruda(内部制备)给药。(B)治疗期间体重变化。如图A所示，抗人CD39抗体与抗人PD-1抗体联合使用比单独使用组对肿瘤生长具有更强的抑制作用，说明B-hPD-1/hCD39小鼠为评价人CD39抗体与人PD-1抗体联合治疗的体内评估提供了一个强有力的临床前模型。数值以平均值±SEM表示。

B-hCD73/hCD39 mice 介绍

01 蛋白表达分析

 采用流式细胞术分析种属特异性CD73和CD39在纯合B-hCD73/hCD39小鼠中的表达。取野生型小鼠(+/+;+/+)和纯合B-hCD73/hCD39小鼠(H/H;H/H)的脾脏细胞，采用特异性抗CD73和抗CD39抗体进行流式细胞术分析。在野生型小鼠中检测到小鼠Cd73和小鼠Cd39；人CD73和人CD39仅在纯合B-hCD73/hCD39小鼠中检测到，而在野生型小鼠中检测不到。

02 脾脏中白细胞亚群分析

 利用流式细胞术分析雌性野生型小鼠和B-hCD73/hCD39小鼠(n= 3,10周龄)脾细胞中白细胞亚群。结果表明纯合B- hCD73/hCD39小鼠中T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞、粒细胞、单核细胞和巨噬细胞的比例与野生型小鼠相似，表明人源化CD73/CD39不会改变这些细胞类型在脾脏、淋巴结、外周血中的整体发育、分化或分布。

03 脾脏中T细胞亚群分析

 利用流式细胞术分析雌性野生型小鼠和B-hCD73/hCD39小鼠(n= 3,10周龄)脾细胞中T细胞亚群。结果表明CD8 + T细胞的百分比,CD4 +细胞亚群在纯合B-hCD73/hCD39小鼠的比例与野生型小鼠相似,证明人源化CD73/CD39并不能改变这类细胞在脾脏、淋巴结、外周血中的整体发育、分化或分布。

 另外，实验表明人源化CD73/CD39亦不会改变白细胞亚群及T细胞亚群在淋巴结、外周血中的整体发育、分化或分布。

参考资料

[1] Achim K. Moesta , Xian- Yang Li  and Mark J. Smyth.(2020). Targeting CD39 incancer. Nature Reviews Immunology. https://doi.org/10.1038/ s41577-020-0376-4