震撼来袭的肿瘤免疫药物验证模型——B-hCD94/hNKG2A mice|BioMice百奥动物

CD94/NKG2是一个C型凝集素受体家族，主要在NK细胞和CD8+ T淋巴细胞亚群表面表达。这些受体刺激或抑制NK细胞的细胞毒活性，因此根据其功能分为激活和抑制受体。为满足肿瘤免疫创新药物的研发需求而构建的CD94/NKG2A人源化小鼠，已经进入百奥动物的人源化小鼠模型平台，详细数据分析结果如下。

基本信息

基因功能简介

自然杀伤(NK)细胞是一种淋巴细胞，它可介导某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的裂解，而无需预先激活。它们还可以调节特定的体液和细胞介导的免疫。KLRD1(CD94)是一种优先表达于NK细胞上的抗原，因其具有外C末端，被归类为Ⅱ型膜蛋白。KLRC1(NKG2A)也是一种与CD94分子二聚化的II型跨膜蛋白。CD94含有一个短的胞质结构域，负责信号转导。CD94/NKG2识别非经典MHC糖蛋白I类（人HLA-E和小鼠Qa-1分子）。NKG2A受体传递抑制信号，在细胞质尾部包含两个免疫受体酪氨酸抑制动机(ITIM)，由序列(I/L/V/S)xYxx(L/V)定义，其中“x”是指给定位置的任何氨基酸。如果携带ITIM的受体与其配体结合，Src家族激酶可能使酪氨酸残基磷酸化，从而允许酪氨酸磷酸酶SHP-1、SHP-2或SHIP的募集。导致参与激活级联反应的酪氨酸激酶底物去磷酸化。因此，NK细胞激活受到抑制。

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肿瘤上的HLA-E表达介导了表达NKG2A的NK细胞和CD8+ T细胞的抑制，导致肿瘤逃逸。

数据分析

NK细胞的蛋白表达分析

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通过流式细胞术分析纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠特异性CD94和NKG2A表达。收集WT和纯合B-hCD94/hNKG2A(H/H)小鼠的脾细胞，用种属特异性CD94或NKG2A抗体进行流式细胞术分析。在WT小鼠中可检测到小鼠CD94和NKG2A。人CD94和NKG2A仅在纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠中可检测到，但在WT小鼠中未检测到。（Monalizumab用于检测WT和纯合B-hCD94/hNKG2A中的人NKG2A蛋白）

B-hCD94/hNKG2A小鼠脾脏白细胞亚群分析

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从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离脾细胞，并通过流式细胞术进行分析以评估白细胞亚群。(A)在单个活的CD45+细胞上有代表性的FACS图，用于进一步分析。(B)FACS分析结果。纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠和C57BL/6小鼠中T、B、NK细胞、单核细胞/巨噬细胞和DC的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其小鼠对应物不会改变这些细胞类型在脾脏中的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

B-hCD94/hNKG2A小鼠脾脏白细胞亚群分析

从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离脾细胞，并通过流式细胞术分析T细胞亚群。(A)对TCRβ+ T细胞有代表性的FACS标记并进一步分析。(B)FACS分析结果。在纯合B-hCD94/hNKG2A和C57BL/6小鼠中，CD8+、CD4+和Treg细胞的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其对应的小鼠不会改变脾脏中这些T细胞亚型的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

B-hCD94/hNKG2A小鼠的淋巴结白细胞亚群分析

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从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离淋巴结，并通过流式细胞术进行分析以评估白细胞亚群。(A)在单个活的CD45+细胞上有代表性的FACS图，用于进一步分析。(B)FACS分析结果。纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠和C57BL/6小鼠中T、B、NK细胞、单核细胞/巨噬细胞和DC的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其小鼠对应物不会改变这些细胞类型在淋巴结中的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

B-hCD94/hNKG2A小鼠的淋巴结白细胞亚群分析

从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离淋巴结，并通过流式细胞术分析T细胞亚群。(A)对TCRβ+T细胞有代表性的FACS标记并进一步分析。(B)FACS分析结果。在纯合B-hCD94/hNKG2A和C57BL/6小鼠中，CD8+、CD4+和Treg细胞的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其对应的小鼠不会改变这些T细胞亚型在淋巴结中的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

B-hCD94/hNKG2A小鼠的血液白细胞亚群分析

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从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离血液，并通过流式细胞术进行分析以评估白细胞亚群。(A)在单个活的CD45+细胞上有代表性的FACS图，用于进一步分析。(B)FACS分析结果。纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠和C57BL/6小鼠中T、B、NK细胞、单核细胞/巨噬细胞和DC的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其小鼠对应物不会改变这些细胞类型在血液中的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

B-hCD94/hNKG2A小鼠的血液白细胞亚群分析

从雌性C57BL/6和B-hCD94/hNKG2A小鼠（n=3，6周龄）中分离血液，采用流式细胞术分析T细胞亚群。(A)对TCRβ+ T细胞有代表性的FACS标记并进一步分析。(B)FACS分析结果。在纯合B-hCD94/hNKG2A和C57BL/6小鼠中，CD8+、CD4+和Treg细胞的百分比相似，表明引入hCD94/hNKG2A代替其对应的小鼠不会改变这些T细胞亚型在血液中的整体发育、分化或分布。数值表示为平均值±SEM。

抗人NKG2A抗体的体内疗效

抗人NKG2A抗体在B-hCD94/hNKG2A小鼠中的抗肿瘤活性。(A)抗人NKG2A抗体可抑制B-hCD94/hNKG2A小鼠体内的hHLA-E MC38肿瘤生长。将鼠结肠癌hHLA-E MC38细胞皮下植入纯合B-hCD94/hNKG2A小鼠（雌性，6-7周龄，n=5）。当肿瘤体积达到约100mm3时，将小鼠分组，并以A组的剂量和时间表给予抗hNKG2A抗体。(B)给药期间的体重变化。如图A所示，抗人NKG2A抗体（monalizumab, in house）可有效控制B-hCD94/hNKG2A小鼠的肿瘤生长，证明其为抗人NKG2A抗体的体内评价提供了有力的临床前模型。数值表示为平均值±SEM。

本期分享到此结束，百奥动物目前拥有一系列人源化小鼠模型，感兴趣的可以点击“阅读原文”获取更多模型信息哦~欢迎分享~