非酒精性脂肪肝炎（NASH）是种比较严重的非酒精性脂肪肝病（NAFLD），以炎症和纤维化为主要特征，可发展为肝硬化、肝衰竭和肝癌。

目前临床上尚未批准任何药物用于NASH，小鼠模型作为重要的NASH研究工具，不仅可以帮助更好的理解NASH的发病机制，还可用于开发和炎症新的治疗策略，为临床试验奠定基础。

病理检测是NASH诊断的“金标准”，对于小鼠NASH模型及药效实验评价亦具有重要意义。了解肝脏组织学是进行NASH病理诊断的重要前提。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的自然病史及其病因危险因素^[1]

小鼠肝脏大体解剖^[2]

小鼠肝分左叶（a）、中间叶（b）、右叶（c、d）和尾叶（e）。左叶最大，尾叶最小，中间叶有两个侧翼。

肝脏组织学

01、肝小叶

肝小叶是肝的基本结构和功能单位。肝脏被膜结缔组织在肝门处随肝动脉、门静脉、胆管、淋巴管和神经的反复分支，深入肝实质，将肝实质分隔呈无数肝小叶，呈多角棱柱体。有的动物（如猪）的肝小叶中央分界明显，小鼠的肝小叶结缔组织很少，相邻肝小叶常连成一片。

肝细胞：以中央静脉为中心单行排列。肝细胞体积大，呈多角行或多面体。胞核大而圆，位于中央。偶尔可见双核细胞。肝细胞是肝小叶的主要成分，约占肝小叶体积的75%。

肝索：肝细胞以中央静脉为中心，呈放射状向周围排列呈板层状结构，称为肝板，切片上，肝板的断面呈索状，称肝索。

肝窦：是位于肝板之间互相分支吻合而成网状腔隙，是肝小叶间静脉及小叶间动脉血流通向中央静脉的通道。肝的血窦内皮与肝细胞之间称为窦周隙，又称“狄氏隙” 。非实质细胞是肝血窦壁及狄氏间隙内存在的4种细胞的总称，包括肝窦内皮细胞、肝巨噬细胞（卵圆形或不规则，胞质形成伪足，附着于内皮细胞上或伸入到窦周隙内）、贮脂细胞(胞质内含脂滴，在各种刺激下分化为成肌纤维细胞，促进胶原纤维的产生)及NK细胞（抑制肿瘤细胞向肝脏转移）。

胆小管：是相邻两个肝细胞之间局部胞凹陷形成的微细管道。它们在肝板内连接 成网格状管道。正常情况下，肝细胞分泌的胆汁排入胆小管，胆汁不会从胆小管溢出至窦周隙。胆小管 (bile canaliculi) 是相邻两个肝细胞之间局部胞凹陷形成的微细管道。

02、肝门管区

相邻肝小叶之间的三角形或不规则结缔组织小区称为肝门管区。其中有小叶间胆管（图示中BD）、小叶间动脉（图示中IA）和小叶间静脉（图示中IV）。

A.SD 大鼠肝门管区 (HE,400×)；B. KM小鼠肝门管区( HE, 400×)^[2]

03、肝-免疫组化鉴别各细胞

04、胆囊

胆囊

大鼠没有胆囊(gallbladder)。小鼠胆囊壁由黏膜、肌层和外膜三层组成。黏膜上皮为单层立方形，固有层为薄层结缔组织，有较丰富的血管、淋巴管和弹性纤维。小鼠胆囊没有黏膜肌层和黏膜下层。肌层较薄，肌纤维排列不甚规则。外膜表面大部覆以浆膜。胆囊的功能是储存和浓缩胆汁。胆囊的收缩排空受激素的调节，进食后，小肠内分泌细胞分泌胆囊收缩素，经血流至胆囊，刺激胆囊肌层收缩， 排出胆汁。

NASH模型

01、造模方法

非酒精性脂肪性肝病的动物模型^[3]

DEN, diethylnitrosamine; HCC, hepatocellular carcinoma; NA, not available; NASH, non-alcoholic steatohepatitis; PTEN, phosphatase and tensin homologue.

02、GAN饮食+CCL4诱导NASH小鼠模型

H&E染色

H&E染色镜下可见肝细胞脂肪变性、肝细胞水肿、小叶内炎症。

NAS评分标准

天狼星红染色

天狼星红染色镜下可见胶原纤维增生。

纤维化病理评分（Ishak评分）或定量

IHC染色

IHC染色（mF4/80、mα-SMA）定量分析可见巨噬细胞增多 、肝星状细胞(激活的)、成纤维细胞和平滑肌细胞增多。

参考资料

[1] Yi Hsun Chen, Wei Kai Wu，et al.Microbiota-Associated Therapy for Non-Alcoholic Steatohepatitis-Induced Liver Cancer: A Review.International Journal of Molecular Sciences[J]. Mol. Sci. 2020, 21, 5999.

[2] 实验动物比较组织学彩色图谱 秦川 科学出版社

[3]Jennie Ka Ching Lau,Xiang Zhang，et al.Animal models of non-alcoholic fatty liver disease: current perspectives and recent advances[J].Journal of Pathology.2017; 241: 36–44.