免疫检查点抑制剂（CPI）彻底改变了晚期实体瘤的治疗模式，加强了众多癌症患者的预后，但仍有部分患者表现出对以PD-1/PD-L1抑制剂为代表的的CPI耐受[1]，解决CPI耐受患者的免疫治疗已成为众多药企的攻关方向。

近期，BioNTech与Genmab联合研发的PD-L1×4-BB双抗药物GEN1046的临床Ⅰ/Ⅱa期结果以《Preclinical Characterization and Phase I Trial Results of a Bispecific Antibody Targeting PD-L1 and 4-1BB (GEN1046) in Patients with Advanced Refractory Solid Tumors》为题发表在IF=39.397的著名学术期刊《CANCER DISCOVERY》上。文章中使用的PD-L1/4-1BB双靶点人源化鼠由百奥动物提供。

文中研究结果表明：GEN1046对于CPI耐药的实体瘤治疗效果良好，安全性高，为免疫联合治疗提供了新的方案

GEN1046是一种全长IgG1亚型的PD-L1×4-1BB 双抗，基于Genmab专利的DuoBody技术平台，通过单克隆全人PD-L1和4-1BB抗体的Fab臂交换产生，保留了天然IgG的结构和药代动力学。抗体包含CH3结构域的对应突变F405L/K409R（促使Fab臂的异源二聚化，生成双特异性分子）和Fc沉默突变 L234F/L235E/D265A（阻止结合FcγR和C1q，去除ADCC、ADCP和CDC效应）。GEN1046结合PD-L1靶点的亲和力常数KD值为：0.16 nM，结合4-1BB靶点的亲和力常数KD值为：0.15 nM。GEN1046在较宽的浓度范围内（0.01-1 μg/mL）能够同时结合PD-L1和4-1BB表达的细胞。

GEN1046促进树突状细胞和T细胞间的相互作用，增强T细胞活化

文中研究结果表明GEN1046增加了每个树突状细胞接触的T细胞数量，同时显著延长树突状细胞和T细胞接触的持续时间。在测定4-1BB活化的细胞实验中看到，当与PD-L1表达的细胞共培养时，GEN1046激活了4-1BB信号；而在无PD-L1表达的细胞中并未观察到4-1BB信号。这提示GEN1046的4-1BB激动活性是严格受条件控制的，即依赖于交联至PD-L1+细胞。GEN1046的最大抑制活性与二价单克隆PD-L1阻断抗体相当，但达到活性水平的浓度略高于对照PD-(L)1阻断抗体。GEN1046在无4-1BB结合时也能阻断PD-1/PD-L1通路，这表明GEN1046 PD-L1特异性的Fab臂也能作为经典免疫检查点抑制剂发挥作用。GEN1046在多克隆和抗原特异性的条件下明显增强了活化CD8+T细胞的增殖。抗原特异性体外实验表明，GEN1046显著、且呈剂量依赖增强了促炎细胞因子的分泌，主要包括IFNγ。GEN1046诱导T细胞增殖和细胞因子分泌增加优于PD-L1单独阻断以及靶向 PD-L1和4-1BB抗体的联合使用，这表明GEN1046诱导T细胞完全活化是有条件的，即依赖于同时结合PD-L1和4-1BB。

GEN1046在体内表现出抗肿瘤特性

在体内研究中，研究人员使用PD-L1/4-1BB双靶点人源化C57BL/6小鼠（hPD-L1/h4-1BB mice）接种转染了人源化PD-L1的MC38肿瘤细胞，建立体内肿瘤模型。对小鼠给予GEN1046治疗3周（5mg/kg，每周2次），以在体内评估GEN1046的抗肿瘤活性。治疗后，所有荷瘤小鼠均对治疗有反应，且相较于对照组，给药组小鼠无进展生存期（PFS）显著延长。在6只疗效达到完全缓解的小鼠中，再次接种MC38-hPD-L1肿瘤细胞不能使这些小鼠产生肿瘤，这表明经GEN1046治疗的小鼠可产生免疫记忆。

GEN1046增强肿瘤反应性、肿瘤浸润性淋巴细胞体外扩增

GEN1046可显著增加非小细胞肺癌患者肿瘤样本中的免疫浸润水平。肿瘤反应性CD8+肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）能够特异性的识别并杀伤肿瘤细胞，GEN1046联合低剂量白细胞介素-2（IL-2）相对于对照组和Atezolizumab给药组可以显著增加样本中肿瘤特异性的TILs水平。

GEN1046在临床中展现出了良好的抑癌效果和可控的药物毒性

GEN1046的临床Ⅰ/Ⅱa期研究纳入了61名晚期实体瘤患者，包括结直肠癌（19.7%），卵巢癌（14.8%），胰腺癌（9.8%），肺癌（NSCLC，9.8%），患者既往接受过抗癌治疗的中位数为3次，其中23人（37.7%）接受过PD-L1疗法。GEN1046的给药剂量范围为：25mg-1200mg，每3周给药一次。该试验的主要终点是表征药物的安全性和有效性，并确定耐受剂量（MTD）。研究结果表明：在安全性方面，共有6名患者出现剂量限制性毒性（DLT），43名患者（70.5%）发生质量相关不良反应（MTD）;在药代动力学方面，当给药剂量低于200mg每3周给药一次的条件下没有出现显著的药物累计，不同计量的半衰期为2.3-10.3天；在有效性方面，截止至2021年2月12日，疾病控制率（DCR）为65.6%。

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参考资料

[1] Sharma P, Siddiqui B A, Anandhan S, et al.The Next Decade of Immune Checkpoint Therapy[J].Cancer Discov,2021, 11 (4): 838-857.