请输入关键字
确定
请输入关键字
确定
中文
想让你的小鼠生一个连?超数排卵了解一下
来源:BioMice百奥动物 时间:2022-01-17

什么是超数排卵?

超数排卵是给雌性供体注射外源性促性腺激素,诱发卵巢和多个卵泡的发育,并排出具有受精能力的卵子的方法,简称超排。

对于超数排卵的应用已经越来越广泛和深入。随着生殖生物学、胚胎工程学以及辅助生殖技术的发展,超数排卵技术越来越多地被应用到工作中去。小鼠在哺乳类实验动物中饲养管理方便,成熟早,繁殖力强,现在已经成为使用量最大、研究最详尽的哺乳类实验动物,在药物筛选、肿瘤研究、遗传研究以及胚胎工程等方面发挥着重要的作用。对小鼠进行超数排卵,获取大量卵母细胞或早期胚胎是进行生殖生理学和胚胎工程学等方面研究的有效途径之一,而获取量多质优的胚胎则是试验成功的前提[1]

卵巢排卵[2]


影响小鼠超数排卵的因素有哪些?

目前对于小鼠超数排卵的国内外研究较多,已知的影响因素众多且错综复杂,本次主要讨论激素、周龄和品系对小鼠超排的影响。

01、激素剂量

生殖激素按照化学性质分类可分为:

① 肽类:下丘脑和垂体激素;

② 类固醇类:性腺激素、肾上腺皮质激素;

③ 脂肪酸类:前列腺素类。

按照分泌器官分类可分为:

① 下丘脑类:GnRH、TRH、GHRH、CRH;

② 垂体类:LH、FSH、TSH、GH、PRL、ACTH等;

③ 性腺类:睾酮,雌二醇,孕酮,抑制素等;

④ 胎盘类:hCG、PMSG、胎盘生长促乳素;

⑤ 子宫内膜类:PG(A、B、E、F);

⑥ 脂肪细胞:Leptin。

其中FSH和LH在超数排卵机制中占据主要作用[3]。超排常用的两种激素是孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG),其中PMSG兼有FSH、LH生物学特性,以FSH活性为主,有明显促卵泡发育作用,有一定的促排卵和黄体形成的功能。HCG的生物学特性与LH相似,亦含有少量FSH活性。它能够促进成熟卵泡破裂排卵,形成黄体。

超数排卵处理所采用的外源性促性腺激素的剂量如果过高,会造成卵巢囊肿。剂量过低则会导致无法完全发挥超数排卵的潜力。目前小鼠超排多采用PMSG与hCG 5IU/只或7.5IU/只的剂量[4]

超排激素[5]

02、周龄

动物生长发育到一定程度,即达到性成熟期。小鼠性成熟日龄因品系及饲养管理条件的不同而有所差异,一般雌性小鼠性成熟为35-50日龄。

C57BL/6品系在不同周龄、相同激素种类和剂量下平均排卵个数对比见表1;

表1 不同周龄小鼠对超数排卵个数的影响


本实验室数据显示,5周龄排卵个数优于8周龄,可能由于其他一些诸如遗传特性、体况、营养状态、卵巢的功能状态、季节、温度、光照、麻醉等因素的影响[6],各实验室结果往往不同,存在着一定的差异性,需要摸索适合自身条件的激素剂量。

03、品系

小鼠品系主要包括近交系、远交系和突变系[7, 8]。小鼠品系对超排效果有明显的影响。近交系由于遗传因素,超排效果较远交系差。不同品系的小鼠,其卵母细胞体外受精率差异显著。这种差异很可能是由于各品系小鼠的不同遗传背景造成[9]。

不同品系在相同周龄、相同FSH剂量下平均排卵个数对比见表2;

表2 不同品系小鼠对超数排卵个数的影响


本实验室数据显示,不同品系排卵数量差异较大。

总之,小鼠超数排卵是一个极其复杂的过程,影响超数排卵效果的因素有小鼠品系、周龄、生理周期、激素的剂量、注射时间、间隔时间等[10]。本次主要讨论了激素剂量、周龄及品系对超数排卵的影响。每个研究得出的超数排卵的最佳条件并不完全统一,因此针对每个个例仍然需要进行深入的摸索研究。


参考文献:

[1]. 吴银玲等, 激素剂量及周龄对小鼠超数排卵的影响. 医学研究与教育, 2016. 33(2): 第1-5,11页.

[2].https://www.sohu.com/a/399485666_120104254?_trans_= 000014_bdss_dkmwzacjP3p:CP=

[3]. 朱娜, 小鼠发情周期卵泡发育、生长因子与促进腺激素受体表达规律及超数排卵研究, 2012, 西北农林科技大学.

[4]. 熊浩, 崔雯与王杏龙, 不同剂量和组合的促性腺激素对小鼠胎儿数的影响. 上海畜牧兽医通讯, 2009(6): 第37页.

[5].https://www.163.com/dy/article/EA0J393905461AMJ.html

[6]. 宋绍征等, 激素剂量、小鼠品系及周龄对超数排卵的影响. 实验动物科学, 2011. 28(4): 第5-8页.

[7]. Charlie, et al., Superovulation strategies for 6 commonly used mouse strains. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science Jaalas, 2011.

[8]. 薛莲, 不同品系小鼠超数排卵与胚胎移植研究, 2016, 沈阳农业大学.

[9]. 赵丹凤等, 不同遗传背景小鼠的超排与体外受精率的比较研究. 上海交通大学学报(农业科学版), 2006(05): 第465-470页.

[10]. 巩雪洁, 臧敦安与许文豪, 周龄·初始注射时间对小鼠超数排卵的影响. 安徽农业科学, 2018. 46(15): 第72-74页.