动物福利要求进行小鼠手术操作前对手术可能造成的疼痛等级进行评估,对于疼痛等级达D级的手术需要给小鼠施以麻醉和镇痛。目前市面上可以用于小鼠麻醉的药剂有很多,但是存活手术需要考虑的不仅仅是药剂的麻醉效果,还需关注药剂本身的安全性、刺激性等等,所以麻醉剂的选用往往是一件比较令人头疼的事情。
➤ 麻醉剂分类
小鼠麻醉剂按照使用方式可以分为吸入类、注射类。
01.吸入类
吸入类麻醉剂如异氟烷、七氟烷等,不仅需要专用的设备,还需考虑操作时麻醉气体逸散对人员的负面影响。虽然具备快速、安全的优点,但高昂的成本和潜在的人员安全风险,往往不会作为小鼠首选的麻醉方式。
02.注射类
注射类麻醉剂相互之间的差异也比较大,安全性也不尽相同。例如水合氯醛,虽然其有较好的镇静催眠作用,但因其对粘膜的强刺激性和对呼吸道的不良影响,以及较小的安全范围,现在已经渐渐不被科研工作者们使用。
巴比妥类的戊巴比妥钠和苯巴比妥那虽然起效快且维持期长,但他们对呼吸系统和心血管系统明显的抑制作用,在肝脏代谢类、呼吸系统研究实验中,不建议使用。
➤ 常用麻醉方式
实验中常用的麻醉方式是不同麻醉剂联用,通过药物的联用解决单一麻醉剂麻醉的常见问题,提高麻醉效果、减少麻醉剂使用量或是提高麻醉操作的安全性。
比较常见的有氯胺酮和甲苯噻嗪联用,甲苯噻嗪的加入,能有效提高氯胺酮麻醉的稳定性。目前应用较多的注射用麻醉剂是舒泰50,它本身就是镇静剂与麻醉剂的联用药。舒泰在小动物尤其是犬猫临床中的麻醉效果非常好,安全性也高,但是在应用到小鼠时,麻醉效果会变得不稳定。为了应对这种情况,我们选择盐酸赛拉嗪与其联用,可以降低麻醉时的个体差异。
小鼠注射药物联用麻醉剂
➤ 麻醉中的注意事项
在实施小鼠麻醉时,有哪些注意点呢?
首先应确定的,是麻醉剂的浓度,如果浓度过高会引起不必要的刺激,甚至造成动物的死亡;而若浓度过低,又会让药物的注射体积增加,对于小鼠而言,单次大体积的注射,也是致命的。
其次便是深度麻醉状态确认和麻醉状态下下小鼠的保温了。深麻状态我们以呼吸均匀、无夹趾疼痛反射、无角膜反射为标准,而若手术过程中小鼠出现尿失禁或剧烈抽搐,则说明麻醉剂量过大,小鼠麻醉过深了。另一方面,在麻醉状态下小鼠的体温调节中枢被抑制,不能自行调节体温,小鼠很容易在环境中失温死亡。所以麻醉状态下的小鼠应放在热台,并在手术结束,小鼠完全苏醒后方可放回笼架。
小鼠麻醉后放热台
另外,冬天时,麻醉剂应在使用前预热至小鼠体温。同时麻醉过程中应随时检查小鼠状态,观察其角膜反射、呼吸、心跳、疼痛反射、肌肉张力等指标,避免小鼠于手术过程中死亡。
根据实验目的以及疼痛等级选择合适的麻醉方式及联用药物,保障动物福利,提高手术操作安全性,可获得更稳定可靠的实验数据。