C57BL/6JNifdc小鼠的生长曲线。1月龄小鼠分为两组（分别为50只雄性和50只雌性）。每月同一天测量一次体重，持续17个月。表格中的最低和最高值是从平均值±标准差计算得出。

年轻和老年小鼠的完整血细胞计数（CBC）。数值以均值±标准差表示。

年轻和老年小鼠的生化检测。数值以均值±标准差表示。

对年轻和老龄鼠的免疫细胞亚群的分析

通过流式细胞术分析年轻和老年C57BL/6J小鼠的脾脏、血液和淋巴结中免疫细胞亚群。检测T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞和调节性T细胞（Tregs）在年轻C57BL/6J小鼠（n=3，2个月龄）和老年C57BL/6J小鼠（n=3，18个月龄）的脾脏（A）、血液（B）和淋巴结（C）中的分化或分布。数值以均值±标准误差（SEM）表示。通过双因素方差分析（two-way ANOVA）检验确定显著性。* p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0.001, **** p < 0.0001。

NK细胞的体内激活。将Poly I:C注射到年轻和老年小鼠体内；24小时后，检测血液（A）和脾脏（B）中DCs和NK细胞上CD69的表达。在老年小鼠中，Poly I:C注射后，DCs和NK细胞中CD69阳性的比例显著降低。

NK细胞的体内激活和IFN-γ及Granzyme的表达。将Poly I:C注射到年轻和老年小鼠体内；24小时后，检测血液（A）和脾脏（B）中DCs和NK细胞上Granzyme B和IFN-γ的表达。在老年小鼠中，Poly I:C注射后，DCs和NK细胞中Granzyme B阳性的比例显著降低。与年轻小鼠相比，老年小鼠中DCs和NK细胞中IFN-γ的比例降低，但没有显著差异。

年轻、中年和老年小鼠对抗PD-1抗体的响应。将小鼠结肠癌MC38细胞（1E5）（A）和5E5（B）分别皮下接种到年轻、中年和老年小鼠。当肿瘤体积达到约80~100mm³时，将小鼠分组，此时给予PBS或抗PD-1抗体治疗。当MC38植入1E5时，抗PD-1单抗能够减少所有年龄组的肿瘤生长，并且在老年组中抗肿瘤效果最显著（A）。然而，当接种剂量为5E5时，抗PD-1单抗仅在年轻组减少肿瘤生长，而在中年组和老年组的小鼠中抗PD-1单抗体并未减少肿瘤生长（B）。

年轻和老年小鼠的体重：
随着年龄增长，小鼠的体重呈上升趋势。

年轻和老年小鼠的生化特征：
老年小鼠的血浆和尿液中的总蛋白和尿素增加。尿液中的肌酐在老年小鼠中增加，而血浆中的肌酐在年轻和老年小鼠之间没有差异。

年轻和老年小鼠的NK和DC细胞的特征：
老年小鼠的NK和DC细胞在刺激后，mGranzyme B和mIFN-γ的产生显著减少，表明雌性C57BL/6小鼠的免疫应答呈年龄依赖性变化。

年轻和老年小鼠中抗PD-1抗体对MC38的抗肿瘤效应：
当MC38接种剂量为1E5时，抗PD-1单抗可以降低所有年龄组的肿瘤生长，且在老年组的抗肿瘤效果最显著。然而，当接种剂量为5E5时，抗PD-1单抗仅能减少年轻组的肿瘤生长，而在中年组和老年组的小鼠中，抗PD-1单抗不能减少肿瘤生长

参考文献